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Méthodes de dosage :


Une méthode permettant d’identifier et de quantifier par LC/SM-SM dans le sang total, plasma et urines. Le tableau résume les conditions opératoires ainsi que les molécules concernées :

Molécules

Extraction

Conditions chromatographiques

Performances de la méthode

Miansérine

Maprotiline

Viloxazine


1 ml d’échantillon extrait par : hexane et alcool isoamylique (99/1) en milieu alcalin (NaOH 2N) après ajout de l’étalon interne (methtylrispéridone). La phase organique est reprise en milieu acide (HCl 0,05N). 20ml de la phase acide sont injectés dans le système chromatographique

Colonne : Xterra RP18 (100x2, 1mm, 5 µm, waters)

CV < 12%

Linéarité : r2 > 99% de 5-100 ng/ml

LQ : 5 ng/ml

Phase mobile : gradient tampon formiate 4mM

(pH 3,2) / ACN

Rendement d’extraction

Débit: 0,3 ml/mn

Sang T

plasma

urine

SM: ionisation positive

59,2% ±21,4

76,9% ±21,4

76,9% ±38,4

Acquisition : MRM

Tableau 15 : Quantification et identification par LC/SM-SM

  1. Inhibiteurs spécifiques de la recapture de la sérotonine :

La structure chimique des ISRS est très hétérogène ce qui explique qu’ils ne puissent pas être détectés en routine par l’analyse toxicologique.

  • Pas de méthode immuno-enzymatique en urgence.

  • Dosage plasmatique par chromatographie liquide avec détecteur à barrette de diodes ou par CPG.


Exemple :
Fluoxétine et son métabolite par GC-NPD :

Une méthode quantitative par chromatographie gazeuse pour la résolution et la détection simultanée du fluoxétine et de son métabolite norfluoxetine dans le plasma, a été développée.

Le procédé requiert 1.0 ml de plasma, extrait avec un mélange de solvants organiques et injection dans un chromatographe en phase gazeuse capillaire avec une colonne de la fondre-silice Ov-1 couplée à un détecteur d'azote-phosphore.

  1. Antidépresseurs à action duale :

        1. Duloxetine (Cymbalta®) par HPLC (Fig.15) :

Les analyses ont été effectuées en utilisant une colonne C8 à phase renversée et une phase mobile composée du tampon aqueux du phosphate pH3.0 à 60% contenant la triéthylamine et l'acétonitrile à 40%.

Le détecteur UV a été placé à 230nm et Loxapine a été utilisée comme un standard interne.

Un prétraitement original des échantillons de plasma a été développé, basé sur l'extraction en phase solide (SPE) avec des cartouches à phase renversée (30mg, 1mL).

Les valeurs de rendements d'extraction étaient supérieures à 90%. La linéarité a été trouvée dans l’intervalle 2 –200 ngmL en duloxetine. Avec LD : 0,7ng/ml et LQ : 2ng/ml .

  1. Conclusion :

Dans l’ensemble, les antidépresseurs atténuent de façon modérée à marquée les symptômes de dépression majeure chez environ 75 % des personnes atteintes,ils doivent habituellement être pris pour la durée naturelle de l’épisode de dépression. Si la nouvelle génération d’antidépresseurs occupe une grande place sur le marché en raison de la réduction des effets secondaires, certains des médicaments classiques sont tout aussi efficaces.

  1. Bibliographie

  • Page,C.P.,Curtis, M.J.,Walker,M.J.,Sutter,,M.C.,Hoffman, B.B. (1999) Pharmacologie intégrée, Tradution de l’édition anglaise, De Boeck Université, Bruxelles.

  • Yves LANDRY, Jean – Pierre GIES , (2003) PHARMACOLOGIE , Des cibles vers l’indication thérapeutique ,Edition DUNOD Université , Louis Pasteur de Strasbourg.

  • Patrick.(2003)Chimie pharmaceutique,Edition De Boeck.

  • Hoffman, Nelson, Gold Frenk (2007) Manual of toxicologic emergency. Edition Mc Graw Hill




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